Краткие сведения о действии комбинированных препаратов представлены в работе Кабинса [142] и в книге Гаррода, Ламберта и ОТрэди [100] «Антибиотики и химиотерапия», где, кроме того, даны типы комбинированного действия, тесты на комбинированное действие и таблица возможного комбинирования препаратов, проявляющих синергидную активность при воздействии на бактерии.
Прежние неопределенные высказывания авторов [129], что активность террамицина в комбинации с двумя или более веществами часто превосходит активность его при применении отдельно, а также [127] что синергизм в микробиологии стал известен с 1923 г.
К тому времени как 2, 4-диаминопиримидины стали серьезно рассматриваться как потенциальные антибактериальные химиотера-певтические препараты, было установлено место их действия.
Исходя из своих первых результатов, Хитчингс и др. [59] предположили, что 2, 4-диаминопиримидины можно считать структурными аналогами фолиевой кислоты. Однако эти вещества меньше подходят для такого сравнения, чем полные структурные аналоги фолиевой кислоты (например, аминоптерин).
Необходимость достижения оптимального соотношения возникает лишь в том случае, когда требуются адекватные концентрации обоих препаратов на участке заражения.
Синергизм триметоприма (ТМП) и сульфаметоксазола Фракциональная ингибирующая концентрация-(МИК комбинации)/(МИК отдельного препарата).
ТМП чаще всего активнее СМЗ в 10—100 раз, поэтому проявление повышенной чувствительности к комбинации этих веществ обычно наблюдается при их сочетании в соотношении 1 :20.
Следующие факты, возможно, подтверждают такую необходимость: а) обработка при сверхвысокой температуре нежелательна для большинства продуктов; б) мировая экономическая интеграция выдвигает новые требования по транспортировке и хранению продуктов в зонах с жарким климатом и во вновь осваиваемых районах, а также в военных целях. Более того, дальнейшее изучение низина представляется оправданным и с точки зрения улучшения качества пищи и предотвращения убытков.
Подвергнутые стрессу клетки оказались более требовательными к питательным веществам среды и более чувствительными к селективным или потенциально токсическим веществам. Однако эти случайные наблюдения не привели к выработке четкой концепции восстанавливаемых повреждений клетки.
В 60-х годах природа повреждений при сублетальных стрессовых воздействиях стала более определенной, так как было установлено, что поврежденные клетки могут восстанавливаться, не проявляя признаков роста.
Из этого следует, что среда с таким высоким содержанием S02 обеспечивает рост меньшего числа микроорганизмов, чем обычная среда без консерванта. Этот феномен можно, очевидно, объяснить тем, что углеводы среды образуют гидрооксисульфоиатные производные, которые не усваиваются клетками.
Таким образом, если это предположение верно, то микроорганизмы могут преодолеть действие S02, если они будут использовать углерод из другого источника.
Кроме того, развитие М. thermosphactum в сосисках само по себе уменьшает содержание S02 до такого уровня, когда двуокись серы перестает быть ингибитором для других микроорганизмов. Это происходит либо в результате образования кислот из углеводов (в ходе развития бактерий), либо из-за образования веществ, которые легко взаимодействуют с S02.
Эффективный метод выделения микроорганизмов имеет важное значение почти для любого микробиологического исследования; если же речь идет о поиске патогенных или потенциально патогенных микроорганизмов, то особое значение приобретают доступные и чувствительные методы для обнаружения и подсчета всех живых микроорганизмов в исследуемом материале.
Антибиотики вносили в виде порошка, а нипагин — в виде 20 %-ного раствора в этаноле. Инкубацию проводили при 30 °С с постоянным встряхиванием с окситетрациклином и нипагином в течение 2 ч, а с нистатином до 24 ч, поскольку дрожжи малочувствительны к этому антибиотику. После инкубации клеточную суспензию разводили 1:20 с помощью СМБ (сердечно-мозговой бульон Дифко + 0,1 % масса/объем твина 80). Твин 80 должен был нейтрализовать остатки нипагина.
coli, поврежденных окситетрациклином, чем на КВА (рис. 12.7). За время эксперимента (160 мин после прекращения обработки антибиотиком) оживление, видимо, происходит не полностью. Добавление ионов Fe++ к восстанавливающей среде (рис. 12.8) приводит к увеличению числа выживших клеток при подсчете их на неселективной среде, указывая тем самым на необходимость инактивации антибиотика, если для подсчета используется даже неселективная среда.
Вполне возможно, что именно в этом кроется основная причина чувствительности к антибиотикам большинства полевых вспышек заболевания, но нередко встречаются случаи, когда реакция на антибиотики отсутствует полностью.
Дальнейшее и успешное исследование действия in vitro антибиотиков, имеющих отношение к природе патологических процессов в тканях вымени и легких, должно быть направлено на повышение антибактериального эффекта в этих тканях, что может стать огромным достижением, которого с таким нетерпением ждут ветврачи и промышленное животноводство, которому они служат.
В течение последних 25 лет этой проблеме были посвящены работы многих исследователей. Наиболее исчерпывающий обзор опубликованных данных был сделан Шульце в 1975 г. [39], который суммировал успехи, достигнутые при применении различных видов лекарств и лекарственных форм, указал на их лечебную эффективность и схемы испытания, а также на проблемы фармацевтической химии и многие другие противоречивые и подлежащие изучению в будущем аспекты терапии вымени коров в сухостойный период.
Большая часть производителей молока оказалась зависимой от необходимости осуществления терапии в сухостойный период, в результате этого в некоторых стадах ухудшились методы запуска коров, снизились сельскохозяйственные стандарты. Поэтому вообще число пораженных инфекциями стад уменьшилось незначительно.
Первая задача терапии в период лактации состоит в том, чтобы купировать уже имеющиеся и новые инфекции с целью их ликвидации.
Частично эта резистентность может быть связана с повышением антимикробной активности бесклеточного молока, поскольку известно [5], что катионные белки из сыворотки молока, коров, которым был введен липополисахарид [ЛПС] Е. coli, проявляли антимикробную активность против стафилококков, стрепп тококков и Е. coli, тогда как сыворотка молока нормальных коров указанной активностью не обладала. Состав секрета вымени прет легком воспалении молочной железы имеет локальное и системное происхождение.
Считается, что бацитрацин активен только против грамположительных бактерий, и действие его состоит главным образом в ингибировании синтеза пептидогликанов и как следствие этого в накоплении его предшественников. Известно также вторичное действие бацитрацина на клеточные мембраны, но механизм этого явления недостаточно ясен. Действие бацитрацина на грамотри-цательные энтеробактерии не привлекло большого внимания, и по общему мнению он считается активным только против грамположительных бактерий.
Все эти приемы достаточно хорошо известны, но они отличаются от систем с применением кислот, позволяющих сохранить качество собранного урожая.
Защитным действием обладают различные химические вещества, однако группа летучих жирных кислот была подвергнута подробному изучению в связи с нетоксичностью при добавлении в корм. Большая часть этих органических кислот обладает некоторым защитным действием; причем пропионовая кислота, очевидно, характеризуется наиболее сильным и специфическим действием на плесени и дрожжи, как это было установлено недавно при изучении защитного действия муравьиной, уксусной, пропионовой, масляной, а также смесей некоторых других кислот.
Трудно допустить, что при более строгом контроле за кормопроизводством указанная ситуация будет представлять серьезную проблему в общенациональном масштабе, чем это было раньше. В то же время необходимо отметить, что в случае использования кормов местного изготовления чаще отмечаются спорадические, только начинающиеся типы субклинического микотоксикоза, особенно в животноводческих хозяйствах, расположенных в зонах возделывания кукурузы.
И все же в отдельных случаях сохранить собранное зерно бывает очень трудно
Обработка кислотой высоковлажного зерна перед хранением имеет, несомненно, хозяйственное и экономическое значение. Окончательная оценка обработанного зерна зависит от пригодности его для реализации. Обсуждение вопросов, связанных с использованием обработанного зерна в пищу, и характеристика его вкусовых качеств выходят за рамки данной статьи, однако необходимо отметить, что в некоторых странах уже начата работа по изучению пригодности в пищу обработанного риса, а обработанная пшеница уже теперь с успехом применяется в хлебопекарном производстве.
nivea к уксусной кислоте.
Уксусная кислота была испытана в качестве активатора аскоспор благодаря тому, что, как известно, ацетальдегид содержит в виде примеси небольшое количество этой кислоты (0,4 %). Ее активирующее действие было установлено (рис. 22.4 и табл. 22.2), но при значительно больших концентрациях, чем те, которые имеются в растворах ацетальдегида. Вследствие примеси уксусной кислоты рН растворов ацетальдегида колеблется в пределах от 2,84 для 8,0 М раствора до 3,49 для 1,0 М раствора.
Сравнивают антимикробную активность смеси (измеряемую по параметрам эффективности, концентрации или времени действия препарата) с активностью ее компонентов А и В. Точно так же ее можно сравнить с активностью любого другого вещества не-
Вещество А обладает большей антимикробной активностью, измеренной, например, по антимикробному эффекту, чем вещество В, так как за одинаковое время t одна весовая единица вещества А убивает больше микробов (в процентах от контроля), чем одна весовая единица вещества В.
В случае такой неожиданно низкой активности мы говорим об антагонизме компонентов.
Следует еще раз подчеркнуть, что действительно имеются только эти три возможности. В бактериологической литературе и: почти во всех учебниках продолжают утверждать о существовании четвертой возможности, называемой индифферентность. К такому утверждению следует откоситься как к недоразумению.
Индифферентность, как было определено выше, является одним из возможных пяти вариантов сравнения активности препаратов по первому нашему методу.
Селекция резистентных к антибиотикам микроорганизмов у животных. Исследователи разных стран установили прямую корреляцию между степенью применения антибиотиков и наличием резистентных к ним форм Е. coli в микрофлоре кишечника домашних животных. В большинстве обзоров, как правило, рассматриваются проблемы, связанные с длительным применением антибактериальных препаратов в целях стимуляции роста животных [13, 14, 39, 57, 60, 64, 90, 95, 96, 99, 101, 105, 113].
, 1700 (36 %) относились к фаготипу 29, среди них 1660 (97,6 %) оказались резистентными к одному или нескольким антибиотикам. Штаммы фаготипа 29, выделенные в 1963 г., первоначально чувствительные ко всем антибиотикам, оказались резистентными к стрептомицину и сульфонамидам. Резистентность к тетрациклину появилась в начале 1964 г.; в июне 1964 г. большинство из исследованных штаммов фаготипа 29 были резистентными к стрептомицину, тетрациклину и сульфонамидам.
Краткие сведения о действии комбинированных препаратов представлены в работе Кабинса [142] и в книге Гаррода, Ламберта и ОТрэди [100] «Антибиотики и химиотерапия», где, кроме того, даны типы комбинированного действия, тесты на комбинированное действие и таблица возможного комбинирования препаратов, проявляющих синергидную активность при воздействии на бактерии.
Прежние неопределенные высказывания авторов [129], что активность террамицина в комбинации с двумя или более веществами часто превосходит активность его при применении отдельно, а также [127] что синергизм в микробиологии стал известен с 1923 г.
К тому времени как 2, 4-диаминопиримидины стали серьезно рассматриваться как потенциальные антибактериальные химиотера-певтические препараты, было установлено место их действия.
Исходя из своих первых результатов, Хитчингс и др. [59] предположили, что 2, 4-диаминопиримидины можно считать структурными аналогами фолиевой кислоты. Однако эти вещества меньше подходят для такого сравнения, чем полные структурные аналоги фолиевой кислоты (например, аминоптерин).
Необходимость достижения оптимального соотношения возникает лишь в том случае, когда требуются адекватные концентрации обоих препаратов на участке заражения.
Синергизм триметоприма (ТМП) и сульфаметоксазола Фракциональная ингибирующая концентрация-(МИК комбинации)/(МИК отдельного препарата).
ТМП чаще всего активнее СМЗ в 10—100 раз, поэтому проявление повышенной чувствительности к комбинации этих веществ обычно наблюдается при их сочетании в соотношении 1 :20.
Следующие факты, возможно, подтверждают такую необходимость: а) обработка при сверхвысокой температуре нежелательна для большинства продуктов; б) мировая экономическая интеграция выдвигает новые требования по транспортировке и хранению продуктов в зонах с жарким климатом и во вновь осваиваемых районах, а также в военных целях. Более того, дальнейшее изучение низина представляется оправданным и с точки зрения улучшения качества пищи и предотвращения убытков.
Подвергнутые стрессу клетки оказались более требовательными к питательным веществам среды и более чувствительными к селективным или потенциально токсическим веществам. Однако эти случайные наблюдения не привели к выработке четкой концепции восстанавливаемых повреждений клетки.
В 60-х годах природа повреждений при сублетальных стрессовых воздействиях стала более определенной, так как было установлено, что поврежденные клетки могут восстанавливаться, не проявляя признаков роста.
Из этого следует, что среда с таким высоким содержанием S02 обеспечивает рост меньшего числа микроорганизмов, чем обычная среда без консерванта. Этот феномен можно, очевидно, объяснить тем, что углеводы среды образуют гидрооксисульфоиатные производные, которые не усваиваются клетками.
Таким образом, если это предположение верно, то микроорганизмы могут преодолеть действие S02, если они будут использовать углерод из другого источника.
Кроме того, развитие М. thermosphactum в сосисках само по себе уменьшает содержание S02 до такого уровня, когда двуокись серы перестает быть ингибитором для других микроорганизмов. Это происходит либо в результате образования кислот из углеводов (в ходе развития бактерий), либо из-за образования веществ, которые легко взаимодействуют с S02.
Эффективный метод выделения микроорганизмов имеет важное значение почти для любого микробиологического исследования; если же речь идет о поиске патогенных или потенциально патогенных микроорганизмов, то особое значение приобретают доступные и чувствительные методы для обнаружения и подсчета всех живых микроорганизмов в исследуемом материале.
Антибиотики вносили в виде порошка, а нипагин — в виде 20 %-ного раствора в этаноле. Инкубацию проводили при 30 °С с постоянным встряхиванием с окситетрациклином и нипагином в течение 2 ч, а с нистатином до 24 ч, поскольку дрожжи малочувствительны к этому антибиотику. После инкубации клеточную суспензию разводили 1:20 с помощью СМБ (сердечно-мозговой бульон Дифко + 0,1 % масса/объем твина 80). Твин 80 должен был нейтрализовать остатки нипагина.
coli, поврежденных окситетрациклином, чем на КВА (рис. 12.7). За время эксперимента (160 мин после прекращения обработки антибиотиком) оживление, видимо, происходит не полностью. Добавление ионов Fe++ к восстанавливающей среде (рис. 12.8) приводит к увеличению числа выживших клеток при подсчете их на неселективной среде, указывая тем самым на необходимость инактивации антибиотика, если для подсчета используется даже неселективная среда.
Вполне возможно, что именно в этом кроется основная причина чувствительности к антибиотикам большинства полевых вспышек заболевания, но нередко встречаются случаи, когда реакция на антибиотики отсутствует полностью.
Дальнейшее и успешное исследование действия in vitro антибиотиков, имеющих отношение к природе патологических процессов в тканях вымени и легких, должно быть направлено на повышение антибактериального эффекта в этих тканях, что может стать огромным достижением, которого с таким нетерпением ждут ветврачи и промышленное животноводство, которому они служат.
В течение последних 25 лет этой проблеме были посвящены работы многих исследователей. Наиболее исчерпывающий обзор опубликованных данных был сделан Шульце в 1975 г. [39], который суммировал успехи, достигнутые при применении различных видов лекарств и лекарственных форм, указал на их лечебную эффективность и схемы испытания, а также на проблемы фармацевтической химии и многие другие противоречивые и подлежащие изучению в будущем аспекты терапии вымени коров в сухостойный период.
Большая часть производителей молока оказалась зависимой от необходимости осуществления терапии в сухостойный период, в результате этого в некоторых стадах ухудшились методы запуска коров, снизились сельскохозяйственные стандарты. Поэтому вообще число пораженных инфекциями стад уменьшилось незначительно.
Первая задача терапии в период лактации состоит в том, чтобы купировать уже имеющиеся и новые инфекции с целью их ликвидации.
Частично эта резистентность может быть связана с повышением антимикробной активности бесклеточного молока, поскольку известно [5], что катионные белки из сыворотки молока, коров, которым был введен липополисахарид [ЛПС] Е. coli, проявляли антимикробную активность против стафилококков, стрепп тококков и Е. coli, тогда как сыворотка молока нормальных коров указанной активностью не обладала. Состав секрета вымени прет легком воспалении молочной железы имеет локальное и системное происхождение.
Считается, что бацитрацин активен только против грамположительных бактерий, и действие его состоит главным образом в ингибировании синтеза пептидогликанов и как следствие этого в накоплении его предшественников. Известно также вторичное действие бацитрацина на клеточные мембраны, но механизм этого явления недостаточно ясен. Действие бацитрацина на грамотри-цательные энтеробактерии не привлекло большого внимания, и по общему мнению он считается активным только против грамположительных бактерий.
Все эти приемы достаточно хорошо известны, но они отличаются от систем с применением кислот, позволяющих сохранить качество собранного урожая.
Защитным действием обладают различные химические вещества, однако группа летучих жирных кислот была подвергнута подробному изучению в связи с нетоксичностью при добавлении в корм. Большая часть этих органических кислот обладает некоторым защитным действием; причем пропионовая кислота, очевидно, характеризуется наиболее сильным и специфическим действием на плесени и дрожжи, как это было установлено недавно при изучении защитного действия муравьиной, уксусной, пропионовой, масляной, а также смесей некоторых других кислот.
Трудно допустить, что при более строгом контроле за кормопроизводством указанная ситуация будет представлять серьезную проблему в общенациональном масштабе, чем это было раньше. В то же время необходимо отметить, что в случае использования кормов местного изготовления чаще отмечаются спорадические, только начинающиеся типы субклинического микотоксикоза, особенно в животноводческих хозяйствах, расположенных в зонах возделывания кукурузы.
И все же в отдельных случаях сохранить собранное зерно бывает очень трудно
Обработка кислотой высоковлажного зерна перед хранением имеет, несомненно, хозяйственное и экономическое значение. Окончательная оценка обработанного зерна зависит от пригодности его для реализации. Обсуждение вопросов, связанных с использованием обработанного зерна в пищу, и характеристика его вкусовых качеств выходят за рамки данной статьи, однако необходимо отметить, что в некоторых странах уже начата работа по изучению пригодности в пищу обработанного риса, а обработанная пшеница уже теперь с успехом применяется в хлебопекарном производстве.
nivea к уксусной кислоте.
Уксусная кислота была испытана в качестве активатора аскоспор благодаря тому, что, как известно, ацетальдегид содержит в виде примеси небольшое количество этой кислоты (0,4 %). Ее активирующее действие было установлено (рис. 22.4 и табл. 22.2), но при значительно больших концентрациях, чем те, которые имеются в растворах ацетальдегида. Вследствие примеси уксусной кислоты рН растворов ацетальдегида колеблется в пределах от 2,84 для 8,0 М раствора до 3,49 для 1,0 М раствора.
Сравнивают антимикробную активность смеси (измеряемую по параметрам эффективности, концентрации или времени действия препарата) с активностью ее компонентов А и В. Точно так же ее можно сравнить с активностью любого другого вещества не-
Вещество А обладает большей антимикробной активностью, измеренной, например, по антимикробному эффекту, чем вещество В, так как за одинаковое время t одна весовая единица вещества А убивает больше микробов (в процентах от контроля), чем одна весовая единица вещества В.
В случае такой неожиданно низкой активности мы говорим об антагонизме компонентов.
Следует еще раз подчеркнуть, что действительно имеются только эти три возможности. В бактериологической литературе и: почти во всех учебниках продолжают утверждать о существовании четвертой возможности, называемой индифферентность. К такому утверждению следует откоситься как к недоразумению.
Индифферентность, как было определено выше, является одним из возможных пяти вариантов сравнения активности препаратов по первому нашему методу.
Селекция резистентных к антибиотикам микроорганизмов у животных. Исследователи разных стран установили прямую корреляцию между степенью применения антибиотиков и наличием резистентных к ним форм Е. coli в микрофлоре кишечника домашних животных. В большинстве обзоров, как правило, рассматриваются проблемы, связанные с длительным применением антибактериальных препаратов в целях стимуляции роста животных [13, 14, 39, 57, 60, 64, 90, 95, 96, 99, 101, 105, 113].
, 1700 (36 %) относились к фаготипу 29, среди них 1660 (97,6 %) оказались резистентными к одному или нескольким антибиотикам. Штаммы фаготипа 29, выделенные в 1963 г., первоначально чувствительные ко всем антибиотикам, оказались резистентными к стрептомицину и сульфонамидам. Резистентность к тетрациклину появилась в начале 1964 г.; в июне 1964 г. большинство из исследованных штаммов фаготипа 29 были резистентными к стрептомицину, тетрациклину и сульфонамидам.