Поскольку большинство использованных в 1976 г. антибиотиков-было выбрано для первичного изучения совершенно случайно, то вполне вероятно, что основную часть пригодных соединений предстоит еще открыть. Одна из главных проблем состоит в том, чтобы увеличить ассигнования на поиск новых микробных метаболитов и получение производных и аналогов соединений с известной активностью и недостатками.
Скорость старения лекарств считается выше 10%, т.
Производство касугамицина, валидами-цина, бластицидина S и полиоксинов стало теперь настолько совершенным, что их стоимость конкурирует со стоимостью других активных соединений. В некоторых случаях часть затрат на приобретение их фермами субсидирует государство, так как производство пищевых продуктов в Японии представляет собой довольно сложную проблему. Компании, производящие антибиотики для сельского хозяйства, порой не выпускают антибиотики для медицины, и экономическим обоснованием этому, видимо, является выгодное соотношение прибыли к расходам, в то время как размеры прибылей в фармацевтической промышленности обычно выше, чем в производстве химикатов для сельского хозяйства.
с 1975 г., то можно установить, что число производственных лабораторий уменьшилось в 2 раза, а академических — в 5 раз. Указанная ситуация может быть результатом перераспределения финансов из различных источников на исследования по молекулярной биологии;
2) сейчас имеется около 30 лабораторий, выполняющих программу получения полусинтетических антибиотиков, главным образом новых цефалоспоринов и пенициллинов.
Поскольку для такой сложной динамической системы трудно предсказать реакцию бактерий на антибиотик, то для изучения этой проблемы была разработана модель in vitro [11]. Экспериментальный подход и интерпретация результатов, получаемых с помощью указанной модели, уже детально описаны [3, 4, 5, 6, 11]. В данных опытах 20 мл закончившей рост бульонной культуры Е. coli разводили свежим бульоном со скоростью 1 мл/мин (нормальная скорость протекания мочи) и через интервалы в 1 ч проводили имитацию мочеиспускания, оставляя при этом в системе 20 мл культуры.
В противоположность этому сульфонамиды обладают замедленным действием, так как даже после прекращения поступления фолиевой кислоты предварительно образованный тетрагидрофолат может полностью удовлетворить потребности клетки до тех пор, пока рост и деление культуры не приведут к разведению его концентрации
до уровня ниже функционального. Когда ТМП присутствует в достаточном количестве, то относительно быстрое ингибирование им роста еще не указывает на истощение пула фолатов, а присутствие сульфонамида не сказывается на проявлении действия ТМП.
aeruginosa, а гентамицин стал первым аминогликозидом, который в течение ряда лет применяли для лечения заболеваний, вызываемых Ps. aeruginosa. Из первоначальных исследований стало ясно, что комбинация карбенициллин + гентамицин проявляет синергидное антибактериальное действие против Ps. aeruginosa in vitro [3, 30]. Кроме того, синергизм был продемонстрирован при лечении экспериментальных инфекций у лабораторных животных [1].
8.3) [48]. Таким образом, все факторы, повреждающие бактериальные клетки и споры (или обладающие неблагоприятным действием на жизненные процессы вегетативных клеток), можно считать потенциальными синергистами низина. К ним, например, можно отнести у-лучи [117], хлористый натрий [121], полифосфаты, используемые в качестве плавких солей в производстве сыра [127], и, вероятно, растворы для засолки.
В то же время низин, по-видимому, инактивируется веществами, повышающими прорастаемость спор, такими, как ионы Mg++ и Са++ [40], моносахара (глюкоза наиболее активна) и полисахара [41], а-аланин, фенилаланин и пируват [39, 108].
Наиболее интенсивно низин синтезируется бактериями в логарифмической фазе их роста [59, 113]. Молочнокислые стрептококки, которые не вырабатывают низин, синтезируют низиноид —основной пептид, отличающийся по антибиотической активности [51], но сходный с низином по электрофорети-ческой подвижности. При инкубации клеточных экстрактов из низинпродуцирующих штаммов с пептидным препаратом низинои-дом происходит образование антибиотика, по-видимому, являющегоея низином [55].
Указанное обстоятельство получило отражение в . решении Комитета экспертов по пищевым добавкам ФАО/ВОЗ: «Применение низина следует считать возможным при средней ежедневной дозе 0—33000 ИЕ/кг массы тела» [138].
Аналитические методы
В течение последних 10 лет особое внимание привлекали три важные аналитические проблемы, связанные с низином: а) определение единицы низина для стандартного препарата; б) принятие международного стандартного эталона низина под эгидой ФАО/ВОЗ; в) включение методов определения и дифференциации низина в издание ФАО/ВОЗ «Спецификация идентичности и чистоты некоторых антибиотиков» [139].
Параллельно изготовленный сыр на обычной закваске весь заплесневел. Это говорит о том, что низин, добавленный в молоко, в количестве, превышающем 30— 35 ИЕ/г, в процессе изготовления сыра переходит в сыворотку [96].
Эдамский сыр, изготовленный с тем же количеством низина и НП-закваской, оказался плохого качества [29]. Увеличивая содержание НП-закваски до 2,0—2,5 % и поддерживая на том же уровне концентрацию низина, удалось избавиться от дефектов, связанных с медленным возрастанием кислотности, в то же время низин подавлял маслянокислое брожение сыра [97] (рис.
Субтилин очень интересный биологический ингибитор, применение которого пока еще не преодолело узких мест, известных в начале 50-х годов. Статус тилозина определен на сессии ФАО/ВОЗ и состоит в следующем [138]: несмотря на отсутствие у тилозина полной перекрестной резистентности со всеми макро-лидами, все же наличие перекрестной резистентности с макроли-дами имеет существенное значение для принятия решения об использовании его в качестве кормовой добавки, хотя применение его позволило бы решить очень важную задачу.
Другие повреждения, как, например, распад ДНК и инактивация ферментов, наблюдаются менее часто, и они вряд ли могут быть причиной общих повреждений. Однако убедительные доказательства указывают на то, что между распадом ДНК и повреждением клеток имеется корреляция, а репарация ДНК отражает восстановление поврежденных клеток. Следовательно, в данный момент можно прийти к не очень информативному заключению о наличии целого ряда различных факторов повреждения, точная роль которых далека от разрешения.
Поэтому до выделения микроорганизмов из среды с антимикробными веществами необходимо убедиться в том, что:
а) ингибитор полностью удален или нейтрализован; б) использованный нейтрализатор (если он применялся) не является токсичным для микроорганизма. Конечно, полностью быть уверенным в каждом из этих случаев довольно трудно, особенно во втором случае. Полноту инактивации антимикробных веществ в препарате можно проверить с помощью известных чувствительных штаммов.
Поэтому в дальнейшем будут рассматриваться вопросы предотвращения болезней животных с позиции сохранения их продуктивности, а не как частные примеры заболеваний, которые-наблюдаются у отдельных животных и требуют индивидуального лечения.
В работе, представленной на Британский ветеринарный конгресс в 1975 г., Пенни писал, что ежегодная потеря потенциальных продуктов животноводства из-за заболеваний на животноводческих комплексах и в птицеводстве США составляет 10— 15 % от всего объема производства.
Интенсивные методы откорма предполагают, что проблема этих заболеваний может меняться от фермы к ферме.
Антибиотикотерапия, по-видимому, остается составной частью профилактических мероприятий во всех животноводческих хозяйствах. Ее успех зависит от детального знания системы производства на каждой ферме.
Как представитель практикующей части ветеринарной профессии, хочу воспользоваться случаем, чтобы обратить внимание на проблему заболеваний, с которыми сталкиваются ветеринары при работе на фермах, а также на то, как они относятся к применению антимикробных препаратов для сохранения здоровья и продуктивности сельскохозяйственных животных.
до 50 % в 1972 г. независимо от их резистентности.
В медицинской литературе имеется множество указаний на сдвиг равновесия в экологии бактерий. В большинстве сообщений отмечается, что инфекции, вызванные грамотрицательными бактериями, значительно преобладают над инфекциями, вызванными грамположительными. Аналогичная проблема была рассмотрена Паркером [30], который писал об использовании антибиотиков в ветеринарии, а также Симмонсоном и Столли [41], которые подвергли критическому разбору использование антибиотиков при профилактике у людей.
Почти идентичную ситуацию наблюдал Грин в 1967 г.
Таблица 15.1. Количество образцов, содержащих остатки ингибирующих веществ (6737 образцов из 561 стада были получены в течение 12 месяцев)
Количество испытанных образцов Содержат остатки ингибирующих веществ Содержат остатки ингибирующих веществ в пределах 0,05 ИЕ/мл и больше Содержат остатки ингибирующих веществ в пределах 0,01—0,04 ИЕ/мл
На рисунке 15.
Результаты описанных выше трех опытов свидетельствуют о том, что высокие дозы сульфонамида или триметоприма неэффективны при раздельном применении для лечения экспериментального салмонеллеза у телят, однако эффективность можно повысить за счет одновременного введения обоих лекарств в невысоких дозах. Заметное увеличение активности in vivo приводит не только к лучшим терапевтическим результатам, но также значительно поднимает степень безопасности, особенно по сравнению с использованием одних сульфонамидов (чаще всего вводимых в дозах 100—200 мг/кг ежедневно).
Для лечения маститов антибиотики применяются уже 30 лет, однако до сих пор это заболевание наносит экономический ущерб. Маститы — сложное заболевание, течение его сильно зависит от условий окружающей среды. Поэтому в схеме профилактики заболевания должен быть предусмотрен ряд приемов, снижающих степень заражения.
При лечении и профилактике маститов широко используются препараты для интрацистернального введения, которые содержат в своем составе антибиотики.
Некоторые случаи плазмидной резистентности являются следствием образования специфического белка, который встраивается во внешнюю мембрану и за счет этого уменьшает ее проницаемость.
Внешний слой клеточной оболочки представляет собой белковую или углеводную капсулу, характер которой определяется типом питания микроорганизма и условиями среды. При сильном уплотнении этого слоя, например у мукоидных штаммов бактерий (рис.
В настоящее время для обработки сена введена система, в основе которой лежит фунгицидное действие пропионовой кислоты. Кислота наносится на сено в виде аэрозоля, имеющего более мелкие капли, чем для зерна, с помощью вращающегося дискового распылителя. Такой распылитель, установленный на пресс-подборщик тюков, или специальный распылитель кислоты, обрабатывающий участок до прохода пресс-подборщика, значительно повышает качество сена.
Уксусная и муравьиная кислоты больше подавляли развитие дрожжей, чем пропионовая кислота. По мнению ряда ученых, остатки зерна от прошлого урожая, обработанные в предшествующие сезоны несколько раз, могут оказаться естественным резервуаром для такого гриба, как Paecilomyces
varioti, и служить источником заражения следующей партии свежесобранного и обработанного зерна [6].
В практических условиях применяемые нормы кислот значительно выше уровня, который считается достаточным для контроля за ростом бактерий в лабораторных условиях (примерно, в 5 раз).
Необходимо отметить, что в принципе нет возражения против принятия указанного выше определения аддитивности, но это ведет к тому, что вещество должно быть названо синергидным или антагонистичным самому себе. По формальным причинам этого запретить нельзя, но тогда термины «синергизм» и «антагонизм» характеризуют ход кривых и не имеют другого значения, означающего, что при синергизме активность смеси неожиданно велика, а при антагонизме неожиданно мала.
Третьим основным типом исследований по распределению антибиотиков является обнаружение их остатков в организме животных после курса лечения. Это позволяет установить соответствующее время удерживания препарата, т. е. тот интервал времени, по истечении которого антибиотик не будет обнаруживаться в мясе или жидкостях тела.
На рисунке 25.3 приведена схема типичного исследования. Вначале животных обследуют на наличие минимальных количеств антибиотиков или антибактериальных веществ, которые они могли получить до опыта.
Антибиотики уже принесли много пользы человеку и животным. Дальнейшая помощь при страданиях и сохранении жизней будет также связана с терапевтическим применением антибиотиков в медицине и ветеринарии. Большое количество антибиотиков используется для профилактики, а также стимуляции роста животных и даже для защиты растений. Нет сомнения в том, что широкое применение антибиотиков сыграло существенную роль с точки зрения экономики как за счет предотвращения убытков, вызванных инфекционными заболеваниями, так и создания условий для удовлетворения постоянно растущих требований к качеству пищевого животного белка.
На поросятах результа-оказался отрицательным. Смит [92] вводил людям до 109 донорских клеток человеческого и животного происхождения и суме" показать некоторую передачу резинстентности постоянной микро флоре, хотя последняя сохраняется в пищеварительном тракте довольно недолго. Аналогичные опыты проводили и другие исследователи [8, 9], которым удалось зарегистрировать большую частоту передачи резистентности лишь после введения соответствующего' антибиотика.
Особое значение имеют два обстоятельства: во-первых, при селекции под влиянием антибиотиков резистентные клетки выживают за счет чувствительных и, размножаясь, становятся доминирующей частью микрофлоры. Во-вторых, как только это произойдет,, начинается перекрестное заражение, и как следствие этого наблюдается дальнейшее проникновение их в микрофлору кишечника других животных и, возможно, человека. Оба эти обстоятельства неизбежно возникают при медицинском, ветеринарном и сельскохозяйственном применении антибиотиков.
Такая передача будет поддерживать и расширять резервуар резистентных бактерий, уже имеющихся у человека. В отличие от круговорота бактерий среди людей в результате перекрестного заражения значение передачи R-факторов от животных к человеку остается довольно сомнительным. В то же время, если животные действительно'
являются источником этих микроорганизмов для человека, то применение или злоупотребление антибиотиками в ветеринарии становится предметом жизненной важности для последующего успешного лечения людей от инфекционных заболеваний.
По данным Смита [92], штаммы животного происхождения хуже обсеменяют пищеварительный тракт, чем человеческие штаммы, однако этот вывод был сделан после обследования лишь одного пациента с небольшим числом штаммов. Кук и др. [17] сообщили о пациентах, выделяющих те же серотипы бактерий, которые имелись в их пище. Это еще раз подтверждает вывод о том, что большинство штаммов Е. coli попадает на кухню с сырым мясом, птицей и другими пищевыми продуктами.
Инфекции мочеполового тракта отличаются от обычных инфекций, вызываемых Е, coli. Положительно зарекомендовало себя применение сульфонамида. Однако известно много случаев инфекций, вызванных штаммами, резистентными к сульфонамиду [28, 83]. Эти наблюдения интересны в том плане, что у животных и птиц обнаружено большое число резистентных к сульфонамидам штаммов Е. coli (см. табл. 26.3).
Резистентность при этой инфекции не является серьезной проблемой, поскольку можно подобрать другие препараты, но суль-фонамиды применять нельзя.
Большинство несистемных энтероинфекций у людей не требует применения антибиотиков, и поэтому при заражении резистентными штаммами неотложных проблем не возникает. Резистентность, обусловленная R-фактором, может представлять проблему лишь при лечении ограниченного числа инфекций, в частности при неонатальных энтеритах, менингитах, при системной салмонеллезной инфекции и энтеролихорадке.
Наличие у животных и птиц довольно большого числа резистентных к антибиотикам штаммов Е.
Однако поскольку использование антибиотиков неизбежно селекционирует резистентность, то рано или поздно это будет иметь значение для отдельных людей, поэтому применение антибиотиков необходимо тщательно регламентировать.
Инфекции у людей, вызванные резистентными бактериями, трудно поддаются лечению, поэтому необходимо сделать все, чтобы уменьшить резистентную микрофлору. В связи с этим возникает вопрос о значении для здоровья людей резервуара резистентных штаммов среди животных.
Хотя в развитии резистентности определенное значение имело терапевтическое применение антибиотиков, тем не менее основной причиной возникновения этого явления служит продолжительное скармливание антибиотиков с целью стимуляции роста животных. Особенно это заметно у свиней и птиц, среди которых очень сильно возросло количество случаев выделения пенициллин- и тетрациклинрези-стентных штаммов Staphylococcus aureus, тетрациклинрезистент-ных штаммов Clostridium welchii и патогенных Е.
Поскольку большинство использованных в 1976 г. антибиотиков-было выбрано для первичного изучения совершенно случайно, то вполне вероятно, что основную часть пригодных соединений предстоит еще открыть. Одна из главных проблем состоит в том, чтобы увеличить ассигнования на поиск новых микробных метаболитов и получение производных и аналогов соединений с известной активностью и недостатками.
Скорость старения лекарств считается выше 10%, т.
Производство касугамицина, валидами-цина, бластицидина S и полиоксинов стало теперь настолько совершенным, что их стоимость конкурирует со стоимостью других активных соединений. В некоторых случаях часть затрат на приобретение их фермами субсидирует государство, так как производство пищевых продуктов в Японии представляет собой довольно сложную проблему. Компании, производящие антибиотики для сельского хозяйства, порой не выпускают антибиотики для медицины, и экономическим обоснованием этому, видимо, является выгодное соотношение прибыли к расходам, в то время как размеры прибылей в фармацевтической промышленности обычно выше, чем в производстве химикатов для сельского хозяйства.
с 1975 г., то можно установить, что число производственных лабораторий уменьшилось в 2 раза, а академических — в 5 раз. Указанная ситуация может быть результатом перераспределения финансов из различных источников на исследования по молекулярной биологии;
2) сейчас имеется около 30 лабораторий, выполняющих программу получения полусинтетических антибиотиков, главным образом новых цефалоспоринов и пенициллинов.
Поскольку для такой сложной динамической системы трудно предсказать реакцию бактерий на антибиотик, то для изучения этой проблемы была разработана модель in vitro [11]. Экспериментальный подход и интерпретация результатов, получаемых с помощью указанной модели, уже детально описаны [3, 4, 5, 6, 11]. В данных опытах 20 мл закончившей рост бульонной культуры Е. coli разводили свежим бульоном со скоростью 1 мл/мин (нормальная скорость протекания мочи) и через интервалы в 1 ч проводили имитацию мочеиспускания, оставляя при этом в системе 20 мл культуры.
В противоположность этому сульфонамиды обладают замедленным действием, так как даже после прекращения поступления фолиевой кислоты предварительно образованный тетрагидрофолат может полностью удовлетворить потребности клетки до тех пор, пока рост и деление культуры не приведут к разведению его концентрации
до уровня ниже функционального. Когда ТМП присутствует в достаточном количестве, то относительно быстрое ингибирование им роста еще не указывает на истощение пула фолатов, а присутствие сульфонамида не сказывается на проявлении действия ТМП.
aeruginosa, а гентамицин стал первым аминогликозидом, который в течение ряда лет применяли для лечения заболеваний, вызываемых Ps. aeruginosa. Из первоначальных исследований стало ясно, что комбинация карбенициллин + гентамицин проявляет синергидное антибактериальное действие против Ps. aeruginosa in vitro [3, 30]. Кроме того, синергизм был продемонстрирован при лечении экспериментальных инфекций у лабораторных животных [1].
8.3) [48]. Таким образом, все факторы, повреждающие бактериальные клетки и споры (или обладающие неблагоприятным действием на жизненные процессы вегетативных клеток), можно считать потенциальными синергистами низина. К ним, например, можно отнести у-лучи [117], хлористый натрий [121], полифосфаты, используемые в качестве плавких солей в производстве сыра [127], и, вероятно, растворы для засолки.
В то же время низин, по-видимому, инактивируется веществами, повышающими прорастаемость спор, такими, как ионы Mg++ и Са++ [40], моносахара (глюкоза наиболее активна) и полисахара [41], а-аланин, фенилаланин и пируват [39, 108].
Наиболее интенсивно низин синтезируется бактериями в логарифмической фазе их роста [59, 113]. Молочнокислые стрептококки, которые не вырабатывают низин, синтезируют низиноид —основной пептид, отличающийся по антибиотической активности [51], но сходный с низином по электрофорети-ческой подвижности. При инкубации клеточных экстрактов из низинпродуцирующих штаммов с пептидным препаратом низинои-дом происходит образование антибиотика, по-видимому, являющегоея низином [55].
Указанное обстоятельство получило отражение в . решении Комитета экспертов по пищевым добавкам ФАО/ВОЗ: «Применение низина следует считать возможным при средней ежедневной дозе 0—33000 ИЕ/кг массы тела» [138].
Аналитические методы
В течение последних 10 лет особое внимание привлекали три важные аналитические проблемы, связанные с низином: а) определение единицы низина для стандартного препарата; б) принятие международного стандартного эталона низина под эгидой ФАО/ВОЗ; в) включение методов определения и дифференциации низина в издание ФАО/ВОЗ «Спецификация идентичности и чистоты некоторых антибиотиков» [139].
Параллельно изготовленный сыр на обычной закваске весь заплесневел. Это говорит о том, что низин, добавленный в молоко, в количестве, превышающем 30— 35 ИЕ/г, в процессе изготовления сыра переходит в сыворотку [96].
Эдамский сыр, изготовленный с тем же количеством низина и НП-закваской, оказался плохого качества [29]. Увеличивая содержание НП-закваски до 2,0—2,5 % и поддерживая на том же уровне концентрацию низина, удалось избавиться от дефектов, связанных с медленным возрастанием кислотности, в то же время низин подавлял маслянокислое брожение сыра [97] (рис.
Субтилин очень интересный биологический ингибитор, применение которого пока еще не преодолело узких мест, известных в начале 50-х годов. Статус тилозина определен на сессии ФАО/ВОЗ и состоит в следующем [138]: несмотря на отсутствие у тилозина полной перекрестной резистентности со всеми макро-лидами, все же наличие перекрестной резистентности с макроли-дами имеет существенное значение для принятия решения об использовании его в качестве кормовой добавки, хотя применение его позволило бы решить очень важную задачу.
Другие повреждения, как, например, распад ДНК и инактивация ферментов, наблюдаются менее часто, и они вряд ли могут быть причиной общих повреждений. Однако убедительные доказательства указывают на то, что между распадом ДНК и повреждением клеток имеется корреляция, а репарация ДНК отражает восстановление поврежденных клеток. Следовательно, в данный момент можно прийти к не очень информативному заключению о наличии целого ряда различных факторов повреждения, точная роль которых далека от разрешения.
Поэтому до выделения микроорганизмов из среды с антимикробными веществами необходимо убедиться в том, что:
а) ингибитор полностью удален или нейтрализован; б) использованный нейтрализатор (если он применялся) не является токсичным для микроорганизма. Конечно, полностью быть уверенным в каждом из этих случаев довольно трудно, особенно во втором случае. Полноту инактивации антимикробных веществ в препарате можно проверить с помощью известных чувствительных штаммов.
Поэтому в дальнейшем будут рассматриваться вопросы предотвращения болезней животных с позиции сохранения их продуктивности, а не как частные примеры заболеваний, которые-наблюдаются у отдельных животных и требуют индивидуального лечения.
В работе, представленной на Британский ветеринарный конгресс в 1975 г., Пенни писал, что ежегодная потеря потенциальных продуктов животноводства из-за заболеваний на животноводческих комплексах и в птицеводстве США составляет 10— 15 % от всего объема производства.
Интенсивные методы откорма предполагают, что проблема этих заболеваний может меняться от фермы к ферме.
Антибиотикотерапия, по-видимому, остается составной частью профилактических мероприятий во всех животноводческих хозяйствах. Ее успех зависит от детального знания системы производства на каждой ферме.
Как представитель практикующей части ветеринарной профессии, хочу воспользоваться случаем, чтобы обратить внимание на проблему заболеваний, с которыми сталкиваются ветеринары при работе на фермах, а также на то, как они относятся к применению антимикробных препаратов для сохранения здоровья и продуктивности сельскохозяйственных животных.
до 50 % в 1972 г. независимо от их резистентности.
В медицинской литературе имеется множество указаний на сдвиг равновесия в экологии бактерий. В большинстве сообщений отмечается, что инфекции, вызванные грамотрицательными бактериями, значительно преобладают над инфекциями, вызванными грамположительными. Аналогичная проблема была рассмотрена Паркером [30], который писал об использовании антибиотиков в ветеринарии, а также Симмонсоном и Столли [41], которые подвергли критическому разбору использование антибиотиков при профилактике у людей.
Почти идентичную ситуацию наблюдал Грин в 1967 г.
Таблица 15.1. Количество образцов, содержащих остатки ингибирующих веществ (6737 образцов из 561 стада были получены в течение 12 месяцев)
Количество испытанных образцов Содержат остатки ингибирующих веществ Содержат остатки ингибирующих веществ в пределах 0,05 ИЕ/мл и больше Содержат остатки ингибирующих веществ в пределах 0,01—0,04 ИЕ/мл
На рисунке 15.
Результаты описанных выше трех опытов свидетельствуют о том, что высокие дозы сульфонамида или триметоприма неэффективны при раздельном применении для лечения экспериментального салмонеллеза у телят, однако эффективность можно повысить за счет одновременного введения обоих лекарств в невысоких дозах. Заметное увеличение активности in vivo приводит не только к лучшим терапевтическим результатам, но также значительно поднимает степень безопасности, особенно по сравнению с использованием одних сульфонамидов (чаще всего вводимых в дозах 100—200 мг/кг ежедневно).
Для лечения маститов антибиотики применяются уже 30 лет, однако до сих пор это заболевание наносит экономический ущерб. Маститы — сложное заболевание, течение его сильно зависит от условий окружающей среды. Поэтому в схеме профилактики заболевания должен быть предусмотрен ряд приемов, снижающих степень заражения.
При лечении и профилактике маститов широко используются препараты для интрацистернального введения, которые содержат в своем составе антибиотики.
Некоторые случаи плазмидной резистентности являются следствием образования специфического белка, который встраивается во внешнюю мембрану и за счет этого уменьшает ее проницаемость.
Внешний слой клеточной оболочки представляет собой белковую или углеводную капсулу, характер которой определяется типом питания микроорганизма и условиями среды. При сильном уплотнении этого слоя, например у мукоидных штаммов бактерий (рис.
В настоящее время для обработки сена введена система, в основе которой лежит фунгицидное действие пропионовой кислоты. Кислота наносится на сено в виде аэрозоля, имеющего более мелкие капли, чем для зерна, с помощью вращающегося дискового распылителя. Такой распылитель, установленный на пресс-подборщик тюков, или специальный распылитель кислоты, обрабатывающий участок до прохода пресс-подборщика, значительно повышает качество сена.
Уксусная и муравьиная кислоты больше подавляли развитие дрожжей, чем пропионовая кислота. По мнению ряда ученых, остатки зерна от прошлого урожая, обработанные в предшествующие сезоны несколько раз, могут оказаться естественным резервуаром для такого гриба, как Paecilomyces
varioti, и служить источником заражения следующей партии свежесобранного и обработанного зерна [6].
В практических условиях применяемые нормы кислот значительно выше уровня, который считается достаточным для контроля за ростом бактерий в лабораторных условиях (примерно, в 5 раз).
Необходимо отметить, что в принципе нет возражения против принятия указанного выше определения аддитивности, но это ведет к тому, что вещество должно быть названо синергидным или антагонистичным самому себе. По формальным причинам этого запретить нельзя, но тогда термины «синергизм» и «антагонизм» характеризуют ход кривых и не имеют другого значения, означающего, что при синергизме активность смеси неожиданно велика, а при антагонизме неожиданно мала.
Третьим основным типом исследований по распределению антибиотиков является обнаружение их остатков в организме животных после курса лечения. Это позволяет установить соответствующее время удерживания препарата, т. е. тот интервал времени, по истечении которого антибиотик не будет обнаруживаться в мясе или жидкостях тела.
На рисунке 25.3 приведена схема типичного исследования. Вначале животных обследуют на наличие минимальных количеств антибиотиков или антибактериальных веществ, которые они могли получить до опыта.
Антибиотики уже принесли много пользы человеку и животным. Дальнейшая помощь при страданиях и сохранении жизней будет также связана с терапевтическим применением антибиотиков в медицине и ветеринарии. Большое количество антибиотиков используется для профилактики, а также стимуляции роста животных и даже для защиты растений. Нет сомнения в том, что широкое применение антибиотиков сыграло существенную роль с точки зрения экономики как за счет предотвращения убытков, вызванных инфекционными заболеваниями, так и создания условий для удовлетворения постоянно растущих требований к качеству пищевого животного белка.
На поросятах результа-оказался отрицательным. Смит [92] вводил людям до 109 донорских клеток человеческого и животного происхождения и суме" показать некоторую передачу резинстентности постоянной микро флоре, хотя последняя сохраняется в пищеварительном тракте довольно недолго. Аналогичные опыты проводили и другие исследователи [8, 9], которым удалось зарегистрировать большую частоту передачи резистентности лишь после введения соответствующего' антибиотика.
Особое значение имеют два обстоятельства: во-первых, при селекции под влиянием антибиотиков резистентные клетки выживают за счет чувствительных и, размножаясь, становятся доминирующей частью микрофлоры. Во-вторых, как только это произойдет,, начинается перекрестное заражение, и как следствие этого наблюдается дальнейшее проникновение их в микрофлору кишечника других животных и, возможно, человека. Оба эти обстоятельства неизбежно возникают при медицинском, ветеринарном и сельскохозяйственном применении антибиотиков.
Такая передача будет поддерживать и расширять резервуар резистентных бактерий, уже имеющихся у человека. В отличие от круговорота бактерий среди людей в результате перекрестного заражения значение передачи R-факторов от животных к человеку остается довольно сомнительным. В то же время, если животные действительно'
являются источником этих микроорганизмов для человека, то применение или злоупотребление антибиотиками в ветеринарии становится предметом жизненной важности для последующего успешного лечения людей от инфекционных заболеваний.
По данным Смита [92], штаммы животного происхождения хуже обсеменяют пищеварительный тракт, чем человеческие штаммы, однако этот вывод был сделан после обследования лишь одного пациента с небольшим числом штаммов. Кук и др. [17] сообщили о пациентах, выделяющих те же серотипы бактерий, которые имелись в их пище. Это еще раз подтверждает вывод о том, что большинство штаммов Е. coli попадает на кухню с сырым мясом, птицей и другими пищевыми продуктами.
Инфекции мочеполового тракта отличаются от обычных инфекций, вызываемых Е, coli. Положительно зарекомендовало себя применение сульфонамида. Однако известно много случаев инфекций, вызванных штаммами, резистентными к сульфонамиду [28, 83]. Эти наблюдения интересны в том плане, что у животных и птиц обнаружено большое число резистентных к сульфонамидам штаммов Е. coli (см. табл. 26.3).
Резистентность при этой инфекции не является серьезной проблемой, поскольку можно подобрать другие препараты, но суль-фонамиды применять нельзя.
Большинство несистемных энтероинфекций у людей не требует применения антибиотиков, и поэтому при заражении резистентными штаммами неотложных проблем не возникает. Резистентность, обусловленная R-фактором, может представлять проблему лишь при лечении ограниченного числа инфекций, в частности при неонатальных энтеритах, менингитах, при системной салмонеллезной инфекции и энтеролихорадке.
Наличие у животных и птиц довольно большого числа резистентных к антибиотикам штаммов Е.
Однако поскольку использование антибиотиков неизбежно селекционирует резистентность, то рано или поздно это будет иметь значение для отдельных людей, поэтому применение антибиотиков необходимо тщательно регламентировать.
Инфекции у людей, вызванные резистентными бактериями, трудно поддаются лечению, поэтому необходимо сделать все, чтобы уменьшить резистентную микрофлору. В связи с этим возникает вопрос о значении для здоровья людей резервуара резистентных штаммов среди животных.
Хотя в развитии резистентности определенное значение имело терапевтическое применение антибиотиков, тем не менее основной причиной возникновения этого явления служит продолжительное скармливание антибиотиков с целью стимуляции роста животных. Особенно это заметно у свиней и птиц, среди которых очень сильно возросло количество случаев выделения пенициллин- и тетрациклинрези-стентных штаммов Staphylococcus aureus, тетрациклинрезистент-ных штаммов Clostridium welchii и патогенных Е.